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多肽的纯度(HPLC)多肽含量(Peptide Content)有何差别?


多肽的纯度(HPLC)多肽含量(Peptide Content)意义不同,订购多肽之前需要明确。

案例:1g 多肽  HPLC 99% 纯度, 80% 多肽含量,水含量10%TFA含量10%

称重:1g

多肽部分:800mg  【其中792mg 是目的多肽(多肽部分的 99%)8mg 是其他肽杂质 (多肽部分的 1%)

水部分:100mg

盐部分: TFA 100mg

一般订购多肽纯度指标,指的是HPLC纯度。


具体解释:

多肽的纯度是指HPLC方法在220nm处检测到的目标多肽的含量(220nm是肽链的吸收波长),紫外分光光度计检测不到水和残留的盐不。可发现其他的杂质包括:缺失序列(缺失了一个或多个氨基酸残基的靶序列),截断序列(加帽过程中产生的序列)脱保护不完全序列(产生于整个合成过程或最后的裂解过程)

多肽纯化不涉及水和盐。HPLC纯化会产生少量的TFA(三氟乙酸),如:游离的氨基末端和其他侧链如ArgLysHis都可生成少量TFA杂质。通常交付的多肽多含有微量TFA和残留水。即使处于冻干状态,水也会因共价结合的能力不同而不同程度地存在着。

纯化前的多肽中包含的杂质包括多肽和非多肽物质纯化后的多肽中包含的杂质除了TFA盐,大多数为序列被修改的多肽。

     a.缺失了一个或多个氨基酸残基的靶序列

     b.为避免缺失序列的产生而进行的加帽操作,截断序列即产生于加帽过程中

     c. 产生于整个合成过程或最后的裂解过程

     d.保护基重新附着在多肽的其他位置  

如果对盐有特殊要求,请在询价时,明确一下(脱盐,转成醋酸盐 等)。如果不注明,做成的多肽都是TFA(三氟乙酸)盐形式。

注意,15vip太阳集团(中国)有限公司官网入口 使用的HPLC 测试体系如下:

Solvent  A: 0.1%Trifluoroacetic in 100% Acetonirile

Solvent  B: 0.1%Trifluoroacetic in 100% Water

Flow rate:1.0ml/min

Wavelength:220nm

色谱柱:C18 反相柱

 

如果您有特殊的分析条件(色谱条件),请在订购之前告知,15vip太阳集团将和商讨。如果您没有特殊要求,15vip太阳集团的测试条件就是上述常用的体系。


多肽含量(Peptide Content)是指与非肽物质(主要为抗衡离子和水)相比的多肽量。可通过氨基酸分析来确定肽净含量。如果您需要这项服务请在订单上明确。






多肽的纯度(HPLC)多肽含量(Peptide Content)有何差别?


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